Главная


Смотрите http://www.montale-original.ru montale Dark Purple.

Реакция связывания комплемента. Оценка метода

Реакция связывания комплемента нашла самое широкое распространение в микробиологической и серологической диагностике, особый интерес она представляет для клинической иммунологии. Результаты исследования выражаются в титрах. За титр принимают количество комплемента, связываемое в присутствии оптимальной дозы антигена и сыворотки, разведенной 1+2. Наибольшее распространение получил метод Кольчера, названный также методом разведения сыворотки. Этим методом в присутствии постоянной дозы антигена определяют обратный титр сыворотки, т. е. выбирают разведение сыворотки, при котором связывается такое количество комплемента, что происходит 50% или полное ингибирование гемолиза. Стремление стандартизовать условия опыта для определения титра позволяет прийти к следующей формуле:

Ет — активность сыворотки (ЕД/мл);
Еа — среднегеометрическое значение активности исследуемой сыворотки;
St — настоящее среднегеометрическое значение активности стандартной сыворотки;
Sa — активность стандартной сыворотки;

Титр может быть выражен по 100% торможению гемолиза или, при более точном титровании, 50% торможению гемолиза. Пример приведен на рис. 78. Важное значение для оценки результатов имеет их специфичность. Для этого используют очистку реагентов, определяют зону эквивалентности, устанавливают состав иммуноглобулинов антисыворотки, проводят контроль специфичности при помощи перекрестного титрования с известными антигенами и антисыворотками. В случае инфекционных заболеваний или иммунизации такие исследования позволяют наблюдать по меньшей мере 4-кратное повышение титра. Отдельно взятые значения результатов РСК, так же как и так называемый базисный титр, следует оценивать весьма критически.